文献类型：期刊文章

作　　者：孙霞[1] 王青山[2] 韩婷婷[2] 李东亮[2] 孙学玲[1] 孙岩[1] 纪虹利[1] 高玉光[2,3]

机构地区：[1]潍坊医学院口腔医学研究所,山东潍坊261000 [2]滨州医学院口腔医学院 [3]滨州医学院附属医院口腔科

出　　处：《口腔医学研究》

基　　金：国家自然科学基金(编号:30973327);山东省自然科学基金(编号:ZR2010HM076)

年　　份：2013

卷　　号：29

期　　号：1

起止页码：1-4

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2013_2014、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:通过研究Ets-2转录因子对调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,进一步明确Ets-2在釉质发育中的作用。方法:应用免疫组化方法观察出生后5d小鼠切牙成釉细胞中Ets-2的表达;在小鼠成釉细胞中分别转染200ng pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2和Ets-2siRNA后,利用实时定量RT-PCR法检测MMP20基因表达的不同变化;用双荧光素酶报告基因检测系统分析Ets-2对MMP-20启动子突变后转录活性的影响。结果:免疫组化显示Ets-2在成釉细胞中呈阳性表达。实时定量RT-PCR研究发现Ets-2过表达后,MMP-20表达水平显著增加;当Ets-2基因沉默后,MMP-20表达水平则显著下降。双荧光素酶报告基因检测系统检测显示,转染pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2的实验组与对照组相比,MMP-20启动子的转录活性升高;对启动子Ets潜在结合部位进行定点突变后,MMP-20启动子的转录活性显著下降,Ets-2丧失上调MMP-20启动子转录活性的作用。结论:小鼠成釉细胞核中Ets-2可通过MMP-20启动子上Ets潜在结合位点,上调MMP-20基因表达水平。

关 键 词：转录因子Ets-2  基质金属蛋白酶-20  免疫组化 RT-PCR 双荧光素酶报告基因检测  

分 类 号：R780.2[口腔医学类]