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儿童急性呼吸道感染中腺病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立
Detecting human adenoviruses in respiratory samples collected from children with acute respiratory infections by loop-mediated isothermal amplification
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]北京大学首都儿科研究所教学医院病毒研究室,100020 [2]首都儿科研究所病毒研究室
基 金:国家自然科学基金,北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划
年 份:2013
卷 号:51
期 号:1
起止页码:52-57
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的利用环介导等温扩增技术(LAMP),建立一种快速可靠的儿童急性呼吸道感染标本中腺病毒检测方法。方法根据腺病毒六邻体基因序列设计特异性LAMP引物,使用实时浊度仪对所建立的LAMP方法进行特异性与灵敏度评估后,对3、7、14型腺病毒分离株共11株进行了检测,随后对经直接免疫荧光法(DFA)鉴定为腺病毒阳性的呼吸道标本36例、腺病毒阴性的呼吸道标本72例分别应用巢式多重PCR和LAMP两种方法进行检测。结果所建立的LAMP方法最低检出腺病毒DNA浓度为1.9×10^2拷贝/ml;方法特异性好,与其他病毒间无交叉反应;11株腺病毒分离株应用LAMP方法检测全部为阳性;36例已经过DFA鉴定为腺病毒阳性的标本中,应用LAMP法共检出腺病毒DNA阳性34例;72例DFA鉴定为腺病毒阴性的标本应用LAMP方法检测5例阳性。本研究建立的LAMP方法与DFA的总符合率为93.5%;与巢式多重PCR的总符合率为98.1%。结论本研究建立的LAMP方法耗时短、灵敏度好、特异性高、操作简便,适用于儿童呼吸道标本中腺病毒的宴聆窜懊谏榆测.具右糖好的章际席用前罱.
关 键 词:腺病毒 人 呼吸道感染 儿童 环介导等温扩增技术
分 类 号:R725.6]
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