文献类型：期刊文章

作　　者：翟远坤[1] 牛银波[1] 潘亚磊[1] 李晨睿[1] 武祥龙[1] 梅其炳[1,2]

机构地区：[1]西北工业大学生命学院空间生物实验模拟技术重点实验室,陕西西安710072 [2]第四军医大学药理教研室,陕西西安710032

出　　处：《中国中药杂志》

基　　金：国家"重大新药创制"科技重大专项(2011ZX09401-308-28);国家自然科学基金项目(81073037;31071043);陕西省中医管理局中医药科研课题(2011ZY44)

年　　份：2013

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：105-111

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、IPA、JST、PUBMED、RCCSE、RSC、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:研究柚皮苷对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3 d换液1次,铺满80%皿底后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7mol·L-1的柚皮苷进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养9 d后的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出最佳浓度。以最佳药物浓度干预ROB的分化成熟,比较柚皮苷组和不加药的对照组之间的骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(oesteopontin,OPN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的分泌量;提取总RNA,Real-time RT-PCR检测bFGF,IGF-1,Runx-2,Osterix,ERα和ERβ的mRNA水平;Western-blot法检测ERα,ERβ和Ⅰ型胶原蛋白的表达量;并用雌激素竞争性抑制剂ICI 182.780进行阻断,观察阻断前后各指标的变化情况。结果:柚皮苷剂量依赖性刺激成骨细胞的增殖,并可强烈促进ROB的分化成熟。最佳药物浓度为1×10-5mol·L-1,该浓度下的柚皮苷可明显提高OC,OPN和BMP-2的分泌量,促进与成骨相关的因子bFGF,IGF-1,Runx-2,Osterix和雌激素受体基因ERα及ERβmRNA的表达,同时也可增强ERα,ERβ和Ⅰ型胶原蛋白的分泌,但以上效果均可被阻断剂ICI 182.780所抑制。结论:浓度为1×10-5mol·L-1的柚皮苷可显著促进ROB的增殖与分化成熟,并且该促进效果会被雌激素通路阻断剂ICI 182.780所抑制,表明柚皮苷属于植物雌激素,通过雌激素信号通路发挥其促骨形成活性,可以用于骨质疏松症的防治。

关 键 词：柚皮苷 成骨细胞 增殖  分化  植物雌激素

分 类 号：R285[中药学类]