文献类型：期刊文章

作　　者：裴冬生[1] 胡书群[1] 赵惠仁[1]

机构地区：[1]徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,徐州221002

出　　处：《生物化学与生物物理学报》

年　　份：2000

卷　　号：32

期　　号：4

起止页码：397-400

语　　种：中文

收录情况：BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RSC、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000088319400018)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：用RT PCR从PHA刺激的人外周血单个核细胞 (PBMC)中扩增出人白细胞介素 18(IL 18)的cDNA ,克隆到表达载体pJW 2中 ,经热诱导后在大肠杆菌中得到高效表达。表达的重组IL 18占菌体总蛋白质的 2 0 % ,表达的蛋白质分子量约为 18kD ,与预期分子量相符。表达产物主要以包涵体的形式存在。包涵体经超声破碎、洗涤后以 8mol/L尿素溶解 ,经SephadexG 10 0柱纯化后 ,纯度可达 90 %以上。纯化的蛋白质在GSH/GSSH的存在下复性 ,得到具有生物学活性的白细胞介素 18。在 0 .5mg/LConA存在的条件下 ,复性产物对人外周血单个核细胞具明显的IFN γ诱生作用。hIL 18的热诱导表达及复性和纯化方法的建立为大量生产rhIL 18打下了基础。

关 键 词：白细胞介素18 表达  纯化 复性 细胞因子

分 类 号：Q786]