文献类型：期刊文章

作　　者：何志勇[1] 陈哲宇[1,2] 邱存平[1] 李彪[1] 张惟杰[3] 吴祥甫[1]

机构地区：[1]中国科学院上海生物化学研究所 [2]第二军医大学神经生物教研室,上海200433 [3]上海交通大学生命科学技术学院

出　　处：《生物化学与生物物理学报》

年　　份：2000

卷　　号：32

期　　号：4

起止页码：333-336

语　　种：中文

收录情况：BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RSC、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000088319400004)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：内皮生长抑制素 (endostatin)是最近报道具有抑制肿瘤生长和转移的蛋白质 ,为此 ,从正常人肝细胞株L0 2中抽提总RNA ,以RT PCR法获得了人内皮生长抑制素编码序列。序列分析表明 ,内皮生长抑制素cDNA开放阅读框架全长 5 5 5bp ,此基因 (GenBank登录号为AF1840 6 0 ) ,共编码 184个氨基酸残基 ,其中基因序列有 5个碱基与文献报道不同 ,蛋白质序列中有 3个氨基酸残基与文献报道不同 ,说明存在人种间差异。将人内皮生长抑制素cDNA插入含T7启动子的质粒pET 2 8a(+)构建表达质粒pET ENDO ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,筛选表达菌株BL ENDO。表达菌株 1mmol/LIPTG诱导表达 3～ 5h后 ,产生大量的重组人内皮生长抑制素 ,并形成包含体。SDS PAGE分析表明 ,表达的重组蛋白占菌株可溶性蛋白质的 2 5 %以上。经纯化和复性后的内皮生长抑制素在小鼠体内具有明显的抑制肿瘤生长和转移的作用。

关 键 词：内皮生长抑制素  抑瘤作用 基因克隆 基因表达

分 类 号：Q785]