文献类型：期刊文章

作　　者：臧莹安[1] 陈国开[1] 庞木生[1] 宋帅[2,3] 李淼[2,3] 李春玲[2,3]

机构地区：[1]仲恺农业工程学院动物科学系,广东广州510225 [2]广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640 [3]广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：广东省农业科技重大专项(2009A020101006);广州市农业科技重大专项(2009A1-E041);广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金资助项目(GSKJ090202)

年　　份：2012

卷　　号：32

期　　号：11

起止页码：1662-1668

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物,扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因,将扩增产物与克隆载体pMDTM18-T连接,转化入感受态细胞DH5α,通过PCR、双酶切及序列测定,测序结果表明:扩增的16株HPS菌中有11株能扩增出hhdA基因,其中10株有测序结果,该10株菌的hhdA基因全基因序列有7种长度,分别为1 754、1 755、1 758、1 759、1 760、1 761和1 762bp。另外,16株HPS菌中有9株能扩增出hhdB基因,该9株菌的hhdB基因全基因序列有7种长度,分别为1 628、1 637、1 639、1 640、1 641、1 646和1 647bp。对于相同血清型的不同菌株来说,它们的2段目的基因序列长度两两不一致。强毒株中,71%的菌株均能扩增出hhdA和hhdB基因;中毒型菌株也基本可以扩增出hhdA和hhdB基因;而无毒型菌株均没有扩增出目的基因。同源性比对可知:所分离菌株的hhdA之间和hhdB基因之间,以及它们分别与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165的hhdA和hhdB基因之间序列同源性都在98%以上,说明所分离的菌株中均含有hhdA和hhdB基因序列。同源系统进化树分析可知,hhdA和hhdB基因在分离菌菌株间具有良好的保守性,可作为研制HPS新型疫苗的候选基因。

关 键 词：副猪嗜血杆菌 hhdA基因  hhdB基因  克隆 序列分析  

分 类 号：S852.612]