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PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌的研究
Detecting of viable Staphylococcus aureus by loop-mediated isothermal amplification coupling with propidium monoazide in dairy products
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨150030 [2]东北农业大学国家乳业工程技术研究中心,黑龙江哈尔滨150030
基 金:国家科技支撑计划项目(2012BAK17B04)
年 份:2012
卷 号:33
期 号:21
起止页码:300-304
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:近年来,金黄色葡萄球菌引起的食品安全事件频发,这就需要建立一种快速准确地检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。传统方法检测食品中金黄色葡萄球菌活菌存在很多缺点。由于细胞死亡后其DNA依然能够存活许久,所以传统方法不能有效区分DNA来自死菌还是活菌。通过荧光染料PMA与快速检测技术LAMP相结合的方法快速、灵敏的检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌,并对死/活菌进行区分。根据金黄色葡萄球菌nuc基因设计引物,并对LAMP反应体系及PMA-LAMP方法进行优化,同时优化了灭菌乳中提取DNA的方法。在纯培养的金黄色葡萄球菌中,PMA-LAMP方法检测灵敏度为3.2CFU/mL,PMA-PCR方法的检测灵敏度为3.2×102CFU/mL;对人工污染灭菌乳中的金黄色葡萄球,PMA-LAMP方法检测灵敏度为5×101CFU/mL,而PMA-PCR方法检测灵敏度为5×103CFU/mL。整个反应需要大约6h,说明PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为快速检测金黄色葡萄球菌活菌的新方法。
关 键 词:PMA—LAMP 金黄色葡萄球菌 乳 检测
分 类 号:TS207.3]
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