文献类型：期刊文章

作　　者：苟冬梅[1] 梁丽亚[1] 刘嵘明[1] 张常青[1] 吴明科[1] 马江锋[1] 陈可泉[1] 朱建国[1,2] 姜岷[1]

机构地区：[1]南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室,江苏南京211816 [2]常茂生物化学工程股份有限公司博士后科研工作站,江苏常州213034

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.21076105);国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2009CB724701);江苏高校优势学科建设工程项目资助~~

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：9

起止页码：1059-1069

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：大肠杆菌NZN111是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldhA)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflB)的发酵生产丁二酸的潜力菌株。厌氧条件下NADH不能及时再生为NAD+,引起胞内辅酶NAD(H)的不平衡,最终导致厌氧条件下菌株不能利用葡萄糖生长代谢。nadD为催化NAD(H)合成途径中烟酸单核苷酸(NaMN)生成烟酸腺嘌呤二核苷酸(NaAD)的烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(Nicotinic acid mononucleotide adenylyltransferase,NAMNAT)的编码基因,通过过量表达nadD基因能够提高NAD(H)总量与维持合适的NADH/NAD+比例。文中构建了重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导表达,重组菌E.coli NZN111/pTrc99a-nadD中NAD+和NADH的浓度分别比宿主菌E.coli NZN111提高了3.21倍和1.67倍,NAD(H)总量提高了2.63倍,NADH/NAD+从0.64降低为0.41,使重组菌株恢复了厌氧条件下生长和代谢葡萄糖的能力。重组菌与对照菌相比,72 h内可以消耗14.0 g/L的葡萄糖产6.23 g/L的丁二酸,丁二酸产量增加了19倍。

关 键 词：丁二酸 烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶  厌氧发酵 大肠杆菌NZN111  NADH/NAD+  

分 类 号：TQ921]