文献类型：期刊文章

作　　者：潘殊男[1] 肖詹蓉[1] 史雨舟[1] 张霖阳[1] 王宇星[1] 李世慧[1] 韩凝[1] 张萍[1]

机构地区：[1]北京天坛生物制品股份有限公司,北京100024

出　　处：《微生物学免疫学进展》

基　　金：国家"十二五"重大新药创制药物大品种技术改造项目(2012ZX09201301-001

年　　份：2012

卷　　号：40

期　　号：4

起止页码：25-28

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立百日咳组分疫苗丝状血凝素(FHA)抗原含量监控的ELISA检测法。方法制备的多克隆抗血清,经辛酸硫酸铵法纯化抗体,用过碘酸钠氧化法辣根过氧化物酶标记,以棋盘滴定法确定最佳包被抗体及酶标抗体的浓度配伍,建立了双抗体夹心ELISA检测法。结果对双抗体夹心ELISA法的特异性、最佳线性范围、检测限度、精密度、准确度、测定限量、适用性的一系列验证试验表明,该方法与百日咳组分疫苗中PT和Prn无明显交叉反应,特异性较好。在0至20 ng/mL测量区间有最佳线性,相关系数大于0.99;经实验内12次及不同试验间3次测定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,变异系数在0.2%～11.4%间,回收率在96.9%～114.5%间,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,因此测定限量为4 ng/mL。结论该方法能有效检测出百日咳杆菌培养上清中的FHA含量,可用于百日咳组分疫苗生产过程的中间品质量控制。

关 键 词：百日咳 丝状血凝素 酶联免疫吸附试验

分 类 号：R392.1]