文献类型：期刊文章

作　　者：孙秀宁[1] 刘志军[2] 管志玉[1] 梁瑞文[1] 张皓云[3] 吴晓燕[2] 于丽[4] 管英俊[4]

机构地区：[1]潍坊医学院人体寄生虫学教研室,潍坊261053 [2]潍坊医学院微生物学教研室,潍坊261053 [3]潍坊医学院人体解剖学教研室,潍坊261053 [4]潍坊医学院组织胚胎学教研室,潍坊261053

出　　处：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》

基　　金：国家自然科学基金(No.30900775);山东省高层次卫生人才1020工程专项基金(No.2008-1);山东省高等学校科技计划项目(No.J12LK04)~~

年　　份：2012

卷　　号：30

期　　号：4

起止页码：253-257

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的探讨大鼠孕早期感染刚地弓形虫对鼠胚胎神经干细胞增殖、分化和迁移的影响。方法12只SD孕鼠随机分为对照组和感染组,每组6只。感染组孕鼠于妊娠第1天(E1天)腹腔注射弓形虫RH株速殖子1×105/只,对照组注射等体积生理盐水。于E5天尾静脉取血,吉氏染色查找虫体。分别于E9、E10和E11天处死孕鼠,每组每次2只,逆转录PCR(RT-PCR)检测羊水中弓形虫B1基因,确认胚胎鼠是否感染弓形虫。体外原代培养鼠胚胎神经干细胞,噻唑蓝(MTT)法检测2组细胞增殖水平。分化培养神经干细胞,免疫荧光法检测巢蛋白(nestin)、微管相关蛋白2(MAP2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,计算对照组和感染组分化为神经元和星形胶质细胞的百分率。取E9、E10和E11天的2组胚胎鼠神经组织作冰冻切片,免疫荧光法检测神经细胞黏附分子(NCAM)在胚胎不同发育时期神经组织中的表达情况。结果血涂片和RT-PCR结果证实,感染组孕鼠和胚胎鼠均感染弓形虫。体外培养神经干细胞,镜下见细胞形态符合神经干细胞特点,神经干细胞标志物nestin蛋白染色呈阳性。MTT结果显示,感染组细胞传代后增殖水平均低于对照组,其中传代后第3和第4天两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。MAP2和GFAP荧光染色结果显示,对照组和感染组神经元分化百分率分别为15.15%(55/363)和8.73%(31/355),两者间差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和感染组星形胶质细胞分化百分率分别为53.35%(199/374)和67.48%(249/369),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。E9、E10和E11天2组胚胎神经组织均检测到NCAM蛋白表达,荧光随时间逐渐增强,对照组表达水平均显著高于感染组(P<0.01)。结论大鼠孕早期感染刚地弓形虫可抑制神经干细胞的增殖、分化和迁移。

关 键 词：刚地弓形虫 神经干细胞 增殖 分化 迁移  

分 类 号：R383.22]