文献类型：期刊文章

作　　者：钟连进[1] 叶巍[1] 文杰[1] 洪德芳[1] 艾冬冬[1] 吕建新[1]

机构地区：[1]温州医学院检验医学院温州医学院生命科学学院浙江省医学遗传学重点实验室,温州325035

出　　处：《中国细胞生物学学报》

基　　金：浙江省重大科技专项(No.2009C13038);浙江省临床检验诊断学重中之重学科;浙江省重点科技创新团队(No.2010R50048)资助项目~~

年　　份：2012

卷　　号：34

期　　号：8

起止页码：781-788

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：构建重组人IL-18-EGF肿瘤靶向分子双顺反子原核表达系统,研究重组人IL-18-EGF融合蛋白对人自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)和人肝癌细胞(SMMC-7721)的影响。构建重组人IL-18-EGF原核双顺反子表达系统pET28a(+)-proIL-18-EGF-Caspase-4/BL21,重组蛋白经纯化后,作用于NK细胞,应用CCK-8法和ELISA试剂盒分别检测NK细胞的增殖情况和IFN-γ的分泌量。Cy3荧光标记IL-18-EGF检测融合蛋白与肿瘤细胞表面EGFR的结合情况。IL-18-EGF与NK细胞共同孵育24 h后,取培养上清液作用于人肝癌细胞SMMC-7721,分别使用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测IL-18-EGF对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。实验结果显示:重组人IL-18-EGF能加快NK细胞的增殖,促进NK细胞分泌IFN-γ;IL-18-EGF能与肿瘤细胞表面EGFR特异性结合;细胞划痕实验中,重组人IL-18-EGF组空白区域的抗填充能力高于对照组;Transwell小室实验中,12,24,48 h时IL-18-EGF组细胞穿膜数分别为94.6±2.9、101.8±4.0和116.2±4.5,均显著低于相应时间的对照组(分别为128.6±8.5、133.0±7.5和138.8±5.4)(P<0.05)。以上结果表明,IL-18-EGF对人肝癌细胞SMMC-7721的迁移和侵袭能力有明显的抑制作用,能提高机体的免疫能力,有可能作为辅助药物运用于肝癌的治疗。

关 键 词：IL-18-EGF  肿瘤靶向因子  肝癌细胞  NK细胞 迁移  侵袭  

分 类 号：R735.7]