文献类型：期刊文章

作　　者：赵丽[1] 杨洋[1] 温传俊[1]

机构地区：[1]南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所,江苏南京210046

出　　处：《南京师大学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金(81171913);2008年江苏省教育厅重大项目(08KJA520001)

年　　份：2012

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：83-88

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、ZR、核心刊

摘　　要：本研究旨在通过茎-环RT-PCR法,建立有效定量miRNA-421的PCR方法,探讨该方法在定量检测miRNA方面的应用价值.利用miRBase数据库获得miRNA-421的成熟序列.设计3条miRNA-421特异性反转录引物,Q-PCR上游引物及通用下游引物.通过10倍梯度稀释RNA后特异性反转录,RT-PCR分析不同引物互相配对PCR的扩增曲线及熔融曲线,鉴定出特异性好、扩增效率高的引物.为进一步鉴定引物的有效性,过表达miRNA-421,用鉴定的成熟引物定量扩增.利用茎-环RT-PCR法设计、鉴定出miRNA-421引物:421RT7、F19,且这对引物特异性好、扩增效率高.通过设计引物组合,茎-环RT-PCR法能够很好地用于miRNA定量分析,并具有准确、快速、节约成本的优点.

关 键 词：茎-环RT-PCR  miRNA-421  引物设计

分 类 号：Q28]