文献类型：期刊文章

作　　者：刘佳琦[1] 潘庆[2] 王耘川[1] 刘洋[1] 王耀军[1] 白丽[1] 白晓智[1] 胡大海[1]

机构地区：[1]第网军医大学西京医院全军烧伤中心、烧伤与皮肤外科,西安710032 [2]解放军第二炮兵工程学院门诊部

出　　处：《中华烧伤杂志》

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：4

起止页码：282-287

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的了解Wnt／β连环蛋白信号在人正常真皮Fb向肌成纤维细胞（MFb）表型转化中的作用及机制。方法采用酶消化法分离培养人难常皮肤真皮Fb。（1）实验1。按随机数字表法将细胞分为4组：对照组，采用无血清DMEM培养液（以下简称培养液）培养；TGF-β1组，用含10ng／ml,氧组人TGF-β1（浓度下同）的培养液培养；Wnt3a组，用含150ng／mL重组人Wnt3a（浓度下同）的培养液培养；TGF-β1＋Wnt3a组，用含重组人TGF-β1和重组人Wnt3a的培养液培养。48h后，分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法，检测Fbβ连环蛋白和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA及蛋白表达水平：（2）实验2。按照随机数字表法将细胞分为4组：对照组、TGF-β1组，处理方法均同实验l；SB415286（糖原合酶激酶3β阻断剂）组，用含10μmol／LSB415286（浓度下同）的培养液培养；TGF-β1＋SB415286组，用含重组人TGF-β1和SB415286的培养液培养。48h后，分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测Fb α-SMA的tuRNA和蛋白表达水平；用免疫荧光细胞化学法检测α-SMA阳性表达情况。各项检测重复3次，对数据进行方差分析及LSD-t检验。结果（1）实验1：①β连环蛋白的mRNA表达水平：对照组、TGF-β1组、Wnt3a组和TGF-β1＋Wnt3a组Fb组间比较，差异无统计学意义（F=0．302，P=0．823）。②β连环蛋白的蛋白表达水平：4组比较，差异l有统计学意义（F=16.713，P=0．001），与对照组表达水平（0．34±0．11）相比，TGF-β1组、Wnt3a组均显著上调（0．73±0．12、0．82-0．17，t值分别为3．028、3．727，P〈0．05或P〈0．01）。TGF-β1＋Wnt3a组（1．23±0．21）显著高于其余3组（t值分别为6．911、3．883、3．184，P值均小于0．01）。③α-SMAmRNA表达水平：4组比较，差异有统计学意义（F=31．830，P=0．001）；与对照组相比，TGF-β．组硅著上调，wnt3a组下

关 键 词：成纤维细胞 转化生长因子1 WNT蛋白质类 表型转化 Β连环蛋白 肌成纤维细胞

分 类 号：R363]