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凡纳滨对虾主要过敏原-原肌球蛋白单克隆抗体的制备及其过敏原表位分析
Preparation of monoclonal antibodies against the major allergen of Litopenaeus vannamei and analysis of its allergenic epitopes
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州510632
基 金:国家自然科学基金(30640026)
年 份:2012
卷 号:28
期 号:9
起止页码:746-749
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的制备凡纳滨对虾主要过敏原-原肌球蛋白的单克隆抗体(mAb),运用它们和虾过敏患者血清分析凡纳滨对虾原肌球蛋白的过敏原表位。方法纯化的凡纳滨对虾原肌球蛋白免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和Western blot筛选并建立稳定分泌抗原肌球蛋白抗体的杂交瘤细胞株;腹水型mAbs经硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化;叠加ELISA分析mAbs的抗原结合表位;虾过敏患者血清lgE与mAbs的抑制Western blot和间接竞争ELISA分析原肌球蛋白的过敏原表位。结果共筛选出5株mAbs,它们之间叠加ELISA的叠加值均高于40%;其中B5和A5能显著抑制虾过敏患者血清IgE与原肌球蛋白的结合,抑制率分别为58.1%和48.6%,同时也能抑制66.7%和44.3%的血清IgE与虾蛋白粗提液反应。结论成功制备了5株分别结合原肌球蛋白不同抗原表位的单克隆抗体,其中B5和A5能结合其过敏原表位。
关 键 词:凡纳滨对虾 主要过敏原 原肌球蛋白 单克隆抗体 过敏原表位
分 类 号:R392.12] R392.11[基础医学类]
参考文献:
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