文献类型：期刊文章

作　　者：任耀军[1,2] 何恩鹏[2] 王新华[3] 薄新文[3]

机构地区：[1]新疆师范大学资产管理处,新疆乌鲁木齐830054 [2]新疆师范大学运动人体科学重点实验室,新疆乌鲁木齐830054 [3]新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子832000

出　　处：《安徽农业科学》

基　　金：新疆兵团科技局基础研究项目(2006JC01);国家自然科学基金(31160218)

年　　份：2012

卷　　号：40

期　　号：25

起止页码：12386-12389

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：[目的]对抗菌肽SMAP-29的基因密码子进行优化,并使其在毕赤巴斯德酵母(Pichia pastoris)中表达。[方法]根据已知抗菌肽SMAP-29的氨基酸序列,参照毕赤巴斯德酵母密码子的偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,并同载体pPIC3.5K连接,电击转化至毕赤酵母受体菌GS115中,经G418筛选高拷贝转化子,并用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型。用甲醇诱导表达构建好的重组酵母表达基因工程菌,并裂解酵母细胞进行Tricine-SDS-PAGE分析。[结果]在诱导至第2天的细胞裂解液中检测到与预测的SMAP-29分子量相当,约为3.2 kD的表达带;表达产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌抑菌效果不明显。[结论]该研究为SMAP-29在生物医学、农业等领域中的应用奠定基础。

关 键 词：SMAP-29  毕赤酵母 胞内表达 抑菌活性

分 类 号：S188]