文献类型：期刊文章

作　　者：田大鹏[1] 葛娟[1] 石峰[1] 李鸿彬[1,2]

机构地区：[1]石河子大学生命科学学院,石河子832003 [2]石河子大学农业生物技术重点实验室,石河子832003

出　　处：《生物技术通报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30860031);农业部转基因专项(2009ZX08005-027B);兵团博士基金项目(2008JC01)

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：7

起止页码：65-69

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：通过RT-PCR方法从棉花纤维组织中克隆得到脱氢抗坏血酸还原酶基因GhDHAR2的cDNA,该基因开放阅读框为639 bp,编码212个氨基酸的蛋白质。同源性序列对比分析显示,GhDHAR2蛋白具有较高的保守性,具有典型的功能结构域,包括GST-N家族和GST-C-DHAR家族的功能结构域;进化树分析显示GhDHAR2和拟南芥AtDHAR2在进化关系上较近。将GhDHAR2基因连接到原核表达载体pET-28a中,将重组载体pET28a-GhDHAR2转入到表达菌株BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达出重组GhDHAR2蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示重组蛋白大小约为28 kD,诱导表达的重组蛋白具有较高的DHAR活性。首次克隆了棉花GhDHAR2基因,通过结构域分析其可能的作用,并成功进行蛋白体外表达及酶活性分析。

关 键 词：棉花 脱氢抗坏血酸还原酶基因克隆  原核表达 DHAR酶活力  

分 类 号：S562]