文献类型：期刊文章

作　　者：曹一鑫[1] 冯新[2] 王建力[1] 陈莉[3]

机构地区：[1]南通大学附属医院皮肤科,226001 [2]江苏省海门市皮肤病防治医院 [3]南通大学医学院病理学系

出　　处：《中华皮肤科杂志》

基　　金：南通市社会发展基金（S2010018）

年　　份：2012

卷　　号：45

期　　号：8

起止页码：569-573

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的在沉默血管内皮生长因子（VEGF）的荷人裸鼠皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）移植瘤中观察肿瘤生长，探讨靶向VEGF小发夹核酸（shRNA）的作用。方法生物合成靶向人VEGF基因的shRNA干扰真核表达质粒（psilencer-VEGFl-shRNA、VEGF-sl；psilencer-VEGF2-shRNA、VEGF-s2），同时合成含随机靶序列的阴性对照表达质粒（psilencer-Target-off-shrank，T-off）。将构建的质粒分别转染于筛选的人皮肤鳞癌细胞株（A431），获得稳转细胞株。实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应、双抗体夹心酶联免疫吸附法分别检测稳转细胞株中VEGFmRNA和VEGF蛋白的表达。用稳转细胞株制备荷人皮肤鳞癌裸鼠移植瘤模型，观察裸鼠体内肿瘤生长，6周后（20d）处死裸鼠进行肿瘤病理学研究，免疫组化染色检测瘤组织VEGF、增殖细胞核抗原（PCNA）和CD34蛋白的表达。应用stata7．0统计学软件进行统计学处理。组间比较采用t检验。结果转染VEGF-sl和VEGF-s2的A431细胞中VEGFmRNA表达分别为27．85±3．95和24．69±2．83，表达量显著低于未转染组（54．06±6．38，￡值分别为6．05和7．29，P值均〈0．01）；VEGF蛋白表达分别为32．67±2．52和29．27±1．10，亦显著低于未转染组（52．85±2．23，t值分别为8．04和11．53，P值均〈0．01）。用转染VEGF-sl和VEGF-s2的A431细胞制备荷人皮肤鳞癌裸鼠移植瘤模型，裸鼠肿瘤体积分别为（192．50±10．90）mm^3和（203．67±3．21）mm^3，明显小于未转染组（272．00±21．07mm^3，t值分别为5．80和5．55，P值均〈0．01）；裸鼠肿瘤重量分别为（0．05±0．03）g和（0．13±0．04）g，与未转染组（0．25±0．02g）比较明显减轻（t值分别为9．60和4．64，P值均〈0．01）；裸鼠肿瘤细胞中VEGF蛋白表达率分别为52．00％±2．00％和56．67％±3．06％，PCNA阳性率分另0为37．01％±2．41％和33．94％±3．25％，CD34阳性血管数分别

关 键 词：癌,鳞状细胞  动物实验  细胞系,肿瘤  RNA干扰 血管内皮生长因子类

分 类 号：R739.5]