文献类型：期刊文章

作　　者：赵国珍[1] 贾育林[2] 严宗卜[3] Christopher W DEREN[3] Melissa H JIA[2] 戴陆园[1]

机构地区：[1]云南省农业科学院粮食作物研究所,云南昆明650205 [2]美国农业部农业研究局,国家水稻研究中心,美国斯图加特AR72160 [3]阿肯色州立大学,水稻研究与推广中心,美国斯图加特AR72160

出　　处：《中国水稻科学》

基　　金：云南省科技攻关计划资助项目(2010BB002);云南省人才培养计划资助项目(2008PY089);云南省技术创新人才海外培训项目;国家863计划资助项目(2010AA10Z104);USDA ARS National Program(NP301)

年　　份：2012

卷　　号：26

期　　号：4

起止页码：495-499

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以水稻叶片、根和种子为材料,采用高通量快速法提取基因组DNA,用稻瘟病Pita基因分子标记进行检测,获得与预期片段大小一致的特异性条带,对165份育种材料的检测结果与稻瘟病接种鉴定一致。操作方法如下:将少量水稻叶片、根或种子放入200μL PCR盘中,加入70μL缓冲液A(含NaOH和Tween20),在PCR仪中加热到95℃,保持10min,再加入70μL缓冲液B(Tris-HCl和EDTA),该提取液可以直接用于PCR扩增。该方法具有几个优点:1)成本低,仅用4种化学试剂,共140μL提取液;2)操作简便,仅需3步,每人每天可以提取上千份样品;3)仪器设备简单,只用常规的PCR仪;4)可直接提取干种子的DNA;5)DNA质量好,能检测出水稻中的抗稻瘟病单基因Pita,并且与稻瘟病接种鉴定结果一致;6)用量少,只需要5～20mg叶片、20mg根或半粒籽粒。尤其是检测大量样本的基因型时,此种方法更显得高效便捷。

关 键 词：水稻 DNA提取 分子标记 PCR 抗稻瘟病基因Pita  

分 类 号：S511]