文献类型：期刊文章

作　　者：张晓磊[1,2] 聂玉哲[1] 蓝兴国[1] 李玉花[1]

机构地区：[1]东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040 [2]大庆麦伯康生物技术有限公司,黑龙江大庆163316

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：黑龙江省发展高新技术产业专项资金(FW11C201);大庆市科技计划(scyc-2010-62);大庆高新区科技专项资金(DQGX10ZS005)

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：7

起止页码：726-729

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:制备抗人载脂蛋白B100(Apo B100)单克隆抗体(mAb),建立人Apo B100双抗体夹心ELISA检测方法。方法:将人Apo B100抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株。将细胞株用无血清培养基扩大培养并纯化上清获得抗体,测定抗体亲和力、亚型、特异性及表位,最后建立双抗体夹心ELISA方法。结果:获得4株抗人Apo B100的杂交瘤细胞株(4-1-2、4-2-2、4-3-2、4-6-3),其分泌的抗体不与其他相关蛋白交叉反应,亲和力达到1×109L/mol。用4-3-2和4-6-3建立的双抗体夹心法的检测范围为(1.3～80)ng/mL,灵敏度1.24 ng/mL,批内变异系数均小于10%,批间变异系数均小于15%,回收率在90%以上。结论:成功制备了抗人Apo B100mAb,建立了定量检测人Apo B100的双抗体夹心ELISA方法,为Apo B100检测及疾病的诊断奠定基础。

关 键 词：人载脂蛋白B100  单克隆抗体 夹心ELISA

分 类 号：R743.3]