文献类型：期刊文章

作　　者：郑方亮[1,2] 朱春玉[1,2] 商玲玲[1,2] 马杰良[1,2] 孙婷婷[1,2] 艾海新[1,2] 朱俊峰[1,2] 段艳婷[1,2] 朱应[1,2] 刘宏生[1,2]

机构地区：[1]辽宁大学生命科学院辽宁省高校动物资源与疫病防治重点实验室,辽宁沈阳110036 [2]辽宁省生物大分子计算模拟与信息处理工程技术研究中心,辽宁沈阳110036

出　　处：《微生物学杂志》

基　　金：病毒学国家重点实验室开放研究基金(2010009);辽宁省教育厅重点实验室项目(2009S043);辽宁大学青年科研基金(LDQN-2011-06)

年　　份：2012

卷　　号：32

期　　号：3

起止页码：1-6

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达载体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达。结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础。

关 键 词：禽流感病毒H5N1  NS1 截短体  原核表达 纯化

分 类 号：Q93]