文献类型：期刊文章

作　　者：李洪利[1,2] 曹金山[1] 王君玮[2] 张维[2]

机构地区：[1]内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266114

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：农业部动物疫情监测项目;公益性行业(农业)科研专项经费

年　　份：2012

卷　　号：39

期　　号：6

起止页码：37-40

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本研究为了建立一套检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的实时荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的23株编码ASFV结构蛋白p72的基因序列,设计引物和探针,优化退火温度、Mg2+浓度和引物、探针浓度,生成标准曲线,进行重复性、敏感性、特异性试验,并检测样品。结果显示,优化的退火温度为60℃,Mg2+终浓度为4mmol/L,引物、探针终浓度分别为0.8、0.3μmol/L。重复性试验变异系数均小于1.3%,敏感性试验最低能够检测到10拷贝/μL的质粒,以其他5种猪病病毒和ASFV质粒为模板进行特异性试验,只有ASFV质粒出现扩增曲线。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法是快速、灵敏、特异的检测ASFV的方法。

关 键 词：非洲猪瘟 ASFV 荧光定量PCR

分 类 号：Q78]