文献类型：期刊文章

作　　者：赵文晶[1,2] 杨振丽[1,2] 顾蓓[1,2] 冯海凉[1,2] 张敏[1,2] 刘艳艳[1,2] 李占稳[1,2] 刘玉琴[1,2]

机构地区：[1]中国医学科学院基础医学研究所 [2]北京协和医学院基础医学院病理学系,北京市100005

出　　处：《中国肿瘤临床》

年　　份：2012

卷　　号：29

期　　号：12

起止页码：817-821

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的：探讨囊泡膜蛋白相关蛋白（VAP33）过表达对小鼠树突状肉瘤细胞DG6增殖及侵袭转移的影响。方法：反转录获得VAP33cDNA，利用基因重组技术构建VAP33-GFP融合基因慢病毒表达载体（pWPXL-VAP33），在脂质体Lipofectamine2000介导下与辅助质粒（PsPAx2、MD2G）共转染293T细胞包装生产重组慢病毒。取病毒上清感染内源性低表达VAP33的DG6细胞，通过荧光显微镜挑选、Western-blot鉴定获得VAP33稳定过表达的阳性单克隆细胞株（DG6-VAP33）。M1vr法检测细胞增殖情况，Transwell和集落形成检测肿瘤细胞体外侵袭、成瘤能力。同时建立小鼠皮下移植瘤模型，连续6周观察VAP33过表达对活体内肿瘤细胞生长、成瘤、转移能力的影响。结果：重组慢病毒表达载体pWPXL-VAP33构建成功，包装滴度达6×10^3IU／mL，感染DG6细胞后筛选到VAP33稳定过表达细胞株（DG6-VAP33）。与DG6细胞相比，DG6-VAP33细胞体外增殖减慢，每孔集落数分别为（52±8）个和（36±5）个（P〈0．05）；Transwell方法观察到，DG6-VAP33细胞体外侵袭能力显著下降，穿膜细胞数（14＋11）个少于DG6（36±17）个（P〈0．01）。通过6周的连续观察，DG6-VAP33组肿瘤生长速度显著慢于DG6组，成瘤率50％（5／10）、肺转移率（0）也明显降低（DG6组成瘤率100％、肺转移率80％）。结论：VAP33过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、成瘤及侵袭转移能力。

关 键 词：树突状肉瘤细胞株  囊泡膜蛋白相关蛋白  增殖 侵袭  转移  

分 类 号：R730.2]