文献类型：期刊文章

作　　者：郑磊[1] 徐贵英[1] 徐岚[1] 徐炜[2] 姜智[1] 吴士良[1]

机构地区：[1]苏州大学医学部生物化学与分子生物学系,江苏苏州215123 [2]苏州大学附属第二医院骨科,江苏苏州215004

出　　处：《中国血液流变学杂志》

基　　金：江苏省研究生创新基金（CX10B-0432）;江苏省自然基金（SBK200920031）

年　　份：2012

卷　　号：22

期　　号：1

起止页码：16-18

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的 建立MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导成骨细胞模型,为进一步了解成骨细胞形成机制打下实验基础.方法 MC3T3-E1 Subclone 14细胞培养至贴壁,加入条件培养基：L-抗坏血酸（50μg/mL）、β-甘油磷酸钠（10mmol/mL）、地塞米松（10-8mol/mL）,培养至21d.倒置显微镜观察细胞形态;碱性磷酸酶（ALP）、Von Kossa染色鉴定成骨细胞和骨细胞;RT-PCR、Western-blot检测成骨细胞相关基因骨钙素、骨唾液酸蛋白、骨桥蛋白等相关生物学指标mRNA和蛋白表达水平,以鉴定成骨细胞体外形成.结果 1.体外诱导MC3T3-E1 Subclone 14至7d,倒置显微镜观察细胞成梭形;2.10d ALP染色结果显示：成骨细胞呈红色;3.14d Von Kossa染色结果显示：细胞表面有矿化结节形成;4.相关基因骨钙素,骨桥蛋白,骨唾液酸蛋白的mRNA和蛋白水平在14d均发生变化.结论 成功建立了MC3T3-E1 Subclone 14体外诱导成骨细胞形成模型.

关 键 词：MC3T3-E1 SUBCLONE 14  成骨细胞 骨矿化

分 类 号：Q813[生物工程类]