文献类型：期刊文章

作　　者：刘静波[1] 潘亚萍[1] 李琛[1] 林莉[1] 钟鸣[2,3]

机构地区：[1]中国医科大学口腔医学院牙周病学教研室,沈阳110002 [2]中国医科大学口腔医学院中心实验室,沈阳110002 [3]中国医科大学口腔医学院病理科,沈阳110002

出　　处：《华西口腔医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81070834)

年　　份：2012

卷　　号：30

期　　号：2

起止页码：192-196

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建牙龈卟啉单胞菌毒力岛基因PG0839突变菌株,为研究PG0839基因功能提供实验基础。方法扩增1 584 bp PG0839基因片段,对聚合酶链反应(PCR)产物和pUC19载体进行BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,连接酶切产物得到质粒pPG0839-1。将2 101 bp erm基因产物插入到pPG0839-1中PG0839基因的EcoRⅤ位点,构建质粒pPG0839-2,作为电穿孔的供体质粒。电穿孔转化于受体菌牙龈卟啉单胞菌W83菌株,红霉素抗性培养基筛选阳性克隆,命名为PG0839基因突变菌株。结果运用插入失活方法构建PG0839基因突变菌株,进而通过酶切、测序、PCR和反转录PCR对PG0839基因突变菌株进行验证,证实PG0839基因突变菌株构建成功。结论本实验成功构建PG0839基因突变菌株。

关 键 词：牙龈卟啉单胞菌 毒力岛  基因打靶

分 类 号：R781.5[口腔医学类]