文献类型：期刊文章

作　　者：张建色[1] 王辉[2] 邵培刚[2] 林贤丰[2] 彭蒙蒙[2] 薛向阳[3] 梅劲[1]

机构地区：[1]温州医学院人体解剖学教研室 [2]温州医学院第一临床医学院 [3]温州医学院微生物与免疫学教研室,浙江温州325035

出　　处：《解剖学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81071576);浙江省教育厅资助项目(Y20106491);温州市科技局资助项目(Y20100012);浙江省新苗计划资助项目(2011R413015)

年　　份：2012

卷　　号：43

期　　号：2

起止页码：253-257

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的通过灌注加浸泡法制备全肾细胞外基质支架,并对该生物支架进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,取肾,行肾动脉留置针插管,灌注压3.6mmHg,恒温37℃依次浸泡灌注肝素化PBS溶液、0.05%胰蛋白酶溶液、1%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、1%Trition X-100溶液以及含青、链霉素的PBS溶液。处理后,行DNA定量与定性分析,透射电镜、HE染色及免疫荧光观察残留细胞核成分,进一步丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肾内血管分布情况。结果去细胞组DNA含量较对照组下降了97%,琼脂糖凝胶电泳未见明显DNA条带;透射电镜、HE染色及免疫荧光观察去细胞组保留了大量细胞外基质,未见明显细胞核成分残留;铸型标本显示去细胞组血管较稀疏,分支完整、清晰。结论联合酶消化法与去垢剂洗涤法,经灌注加浸泡法处理的全肾,可有效清除肾内所有细胞成分,较好地保留细胞外基质支架和血管网络结构,是一种简单易行且较为理想的制备组织工程肾生物支架的方法。

关 键 词：去细胞 肾  细胞外基质 血管铸型 组织工程  免疫荧光 大鼠  

分 类 号：R322]