文献类型：期刊文章

作　　者：潘红丽[1] 仲飞[1] 潘素敏[1,3] 李秀锦[2] 张峰[1] 张考[1] 陈慧慧[1]

机构地区：[1]河北农业大学动物医学院基础兽医部,农业部动物疫病病原生物学华北科学观察实验站,保定071001 [2]燕山大学环境与化学工程学院生物工程系,秦皇岛066004 [3]河北科技师范学院动物科技学院,秦皇岛066004

出　　处：《微生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(30771586);河北省自然科学基金(C2008000244)~~

年　　份：2012

卷　　号：52

期　　号：3

起止页码：367-373

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】研究犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)非结构蛋白NS1在CPV引起宿主细胞凋亡中的作用,初步探讨CPV引起细胞凋亡的机制。【方法】首先采用PCR方法从犬细小病毒基因组中扩增NS1编码基因,然后利用pcDNA3.1A质粒构建NS1真核表达载体pcDNA-NS1,并通过HEK293FT细胞瞬时表达NS1重组蛋白,用Western-blot检测以确定重组NS1蛋白能否在真核细胞中表达。然后用CPV感染和用pcDNA-NS1表达载体转染F81宿主细胞,通过AnnexinV/PI双染法检测磷脂酰丝氨酸外翻和通过化学发光法检测caspase-3/7活性,分析感染CPV或转染NS1基因对F81宿主细胞凋亡的影响。【结果】结果表明,本实验扩增的NS1基因序列与GenBank的序列一致,构建的表达载体结构正确,并能够介导NS1基因在真核细胞中表达。感染CPV和转染NS1基因均能诱导F81细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻和明显提高细胞内caspase-3/7的活性,表明CPV和NS1蛋白均能引起细胞的凋亡。【结论】CPV诱导宿主细胞凋亡与其编码的NS1非结构蛋白有关。

关 键 词：犬细小病毒 NS1蛋白 细胞凋亡

分 类 号：S852.65]