文献类型：期刊文章

作　　者：姜茵[1] 奚月[1] 李妍[1]

机构地区：[1]南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所,广州510515

出　　处：《生物技术通报》

基　　金：国家自然科学基金项目(31070119)

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：2

起止页码：102-106

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：旨在利用GST融合基因表达系统表达幽门螺杆菌Catalase融合蛋白,并利用凝血酶切除GST标签。将重组质粒Catalase/pGEX-4T-1转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,用IPTG进行诱导表达,菌体经反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌后,Catalase/GST融合蛋白以部分可溶性的形式表达在上清中。采用谷胱甘肽琼脂糖树脂Glutathione Sepharose 4B对其进行纯化,得到Catalase/GST融合蛋白,再用凝血酶进行GST标签的切除,所得产物进行Western blotting鉴定。高效表达出Catalase/GST融合蛋白的相对分子质量约85 kD,凝血酶成功地切除了GST标签,Western blotting证实Catalase蛋白能被鼠抗Catalase单克隆抗体识别。

关 键 词：幽门螺杆菌 CATALASE 融合表达  GST标签切除  纯化

分 类 号：R378]