文献类型：期刊文章

作　　者：刘彬[1] 黄佳城[1] 周迎春[1] 孙学刚[2] 曾文璧[1] 李杏[1] 臧书文[1] 郝文文[1]

机构地区：[1]南方医科大学南方医院中医科,广东广州510515 [2]南方医科大学中医药学院分子生物学实验室,广东广州510515

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(30973850;81173459);广东省科技计划项目(2010B060500009)~~

年　　份：2012

卷　　号：32

期　　号：2

起止页码：165-168

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.7-LOXl。慢病毒载体及包装载体dR8.9、VSVG共转染293FT细胞包装慢病毒。慢病毒侵染H9C2大鼠心肌细胞,RT-PCR鉴定对LOX-1抑制效率,CCK-8、Hochest33258染色检测LOX-1对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响。结果通过双酶切鉴定,证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,抑制LOX-1能抑制H_2O_2诱导的细胞活力下降,减轻H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡,与H_2O_2组比较均有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建靶向大鼠LOX-1基因RNAi慢病毒载体,LOX-1激活可能在H_2O_2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用。

关 键 词：慢病毒 RNA干扰 LOX-1 氧化应激 凋亡

分 类 号：R54]