文献类型：期刊文章

作　　者：姜茵[1] 奚悦[1] 王小平[1] 何殿殿[1] 李妍[1]

机构地区：[1]南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所,广东广州510515

出　　处：《生物技术》

基　　金：国家自然科学基金项目("幽门螺杆菌Lpp20的H-2d限制性Th表位的鉴定及免疫学特性的研究";31070119)资助

年　　份：2011

卷　　号：21

期　　号：4

起止页码：22-26

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、核心刊

摘　　要：目的:利用GST融合基因表达系统表达Lpp20-GST融合蛋白,并利用凝血酶切除GST标签。方法:IPTG诱导重组质粒Lpp20/pGEX-4T-1在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,菌体经反复冻融、溶菌酶裂解及超声破菌后,发现Lpp20-GST融合蛋白以部分可溶性的形式表达。采用GST蛋白纯化系统对其纯化,得到Lpp20-GST融合蛋白,再用凝血酶进行GST标签的切除,所得产物进行Western Blot鉴定。结果:高效表达出Lpp20-GST融合蛋白的相对分子质量约4.5kDa,凝血酶成功切除了GST标签,Western Blot证实Lpp20蛋白能被鼠抗Lpp20单克隆抗体识别。结论:成功表达和纯化了重组Lpp20蛋白,为深入研究Lpp20的功能奠定了基础。

关 键 词：幽门螺杆菌 LPP20 融合表达  GST标签切除  纯化

分 类 号：Q786]