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提高重组表达体系相对活性促进外源蛋白表达:人干扰素毕赤酵母表达体系研究
Promote the Expression of Foreign Protein by Improving Relative Cell Viability:Expression of the Fusion Human Interferon in Pichia pastoris
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]江南大学医药学院生物制药系,江苏无锡214122 [2]江南大学教育部工业生物技术重点实验室,江苏无锡214122
基 金:长江学者和创新团队发展计划(No IRT0532)资助;国家重大新药创制专项(N02009ZX09102-221);国家自然基金(31000016);江苏省自然科学基金(企业博士创新项目BK2009518);江苏省科技支撑计划(BE2009629)
年 份:2011
卷 号:37
期 号:11
起止页码:11-15
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、JST、RCCSE、RSC、ZGKJHX、核心刊
摘 要:以毕赤酵母KM71/IH的hIFNβ-HAS表达体系为研究对象,较为系统地研究了不同因素引起的细胞相对活性变化与毕赤酵母外源蛋白表达的相关性。结果表明:(1)细胞相对活性变化与外源蛋白的表达成正相关;(2)处在对数生长中后期的细胞相对活性最高,更适合用于外源蛋白的表达;(3)诱导阶段的环境因素直接影响诱导期细胞相对活性,合适的甲醇浓度、诱导pH及温度是维持细胞高活性,促进外源蛋白高表达的关键。对于hIFNβ-HAS表达体系最佳诱导条件为:以培养21~24h的细胞为诱导种子,初始甲醇浓度为2%(V/V),pH6.0,25℃,细胞活性维持在98%以上,hIFNβ-HSA表达量高达45.6mg/L,较优化前提高了62.3%。
关 键 词:毕赤酵母 细胞相对活性 外源蛋白表达 人β干扰素
分 类 号:Q78]
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