文献类型：期刊文章

作　　者：钟翡[1] 沈欣杰[1] 刘芳[1] 袁华招[1] 刘兰英[2] 李天红[1]

机构地区：[1]中国农业大学农学与生物技术学院,北京市果树逆境生理与分子生物学重点开放实验室,北京100193 [2]北京市海淀区植物组织培养技术实验室,北京100091

出　　处：《园艺学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30871696,31171938);公益性行业(农业)科研专项(201003021)

年　　份：2012

卷　　号：39

期　　号：1

起止页码：143-150

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：利用RT-PCR和RACE技术从甜樱桃(Prunus avium L.)嫩叶中克隆了赤霉素信号转导途径中的关键负调控因子DELLA蛋白基因cDNA全序列,将其命名为PaGAI。该基因cDNA全长2310bp,开放阅读框ORF为1788bp,推测其编码一个含有595个氨基酸残基的多肽链,蛋白质分子量约64kD。生物信息学分析结果表明,PaGAI编码蛋白具有DELLA蛋白保守结构域,其N端存在两个非常保守的酸性结构域DELLA和VHYNP作为信号感知区域,C端有VHIID、RVER和SAW结构域作为阻遏区域。PaGAI与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性,其中与苹果MdRGL2b蛋白同源性最高,达到84%。构建pGEX-4T-1/PaGAI原核表达体系,并转化E.coli BL21,经0.5mmol·L-1IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE检测获得了分子质量为91kD的融合蛋白,半定量RT-PCR分析表明,PaGAI在花、果实、叶片、韧皮部中普遍表达,在花与韧皮部中的表达远远强于在果实与叶片中的表达。

关 键 词：甜樱桃 DELLA蛋白 基因克隆 原核表达

分 类 号：S662.5]