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RNA干扰Notch1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响
Effect of Notch1 gene silencing by RNA interference on proliferation and apoptosis of human breast cancer line MCF-7
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]大连医科大学中日临床病理中心,大连116044
基 金:国家自然科学基金资助项目(30870968);教育部高等学校博士学科点专项科研基金(200801610001)
年 份:2012
卷 号:28
期 号:1
起止页码:11-14
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的探讨RNA干扰技术沉默Notch1基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并合成靶向Notch1基因的小分子干扰RNA质粒,在转染试剂Sofast介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用RT-PCR和Western blot法检测转染前、后Notch1基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体;cck8比色法检测分析各组细胞的存活率;流式细胞术检测细胞凋亡比例;Western blot法检测转染各组MCF-7细胞Notch1、NF-κB及Caspase-3蛋白表达。结果 Notch1-shRNA能有效封闭Notch1基因的表达,Notch1基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);Notch1-shRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);转染48h后细胞凋亡比例增加(P<0.01)。NF-κB蛋白水平表达降低,Caspase-3蛋白表达水平增高。结论利用RNA干扰技术沉默Notch1基因的表达可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节相关凋亡蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡和增殖,靶向Notch1的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值。
关 键 词:乳腺肿瘤 NOTCH1 RNA干扰 凋亡
分 类 号:R737.9]
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