文献类型：期刊文章

作　　者：汪永信[1] 安虹[1] 程坚[1] 程潇[1] 刘娟娟[1] 张波[1]

机构地区：[1]国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心,合肥230051

出　　处：《生物技术通报》

基　　金：安徽省科技计划项目(11010402143);安徽省质监局科研项目(皖质函【2010】171号)

年　　份：2012

卷　　号：28

期　　号：1

起止页码：134-138

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、兔、驴、鹿、狗、马、鸽子、大豆、玉米、小麦、大米、马铃薯及番茄的线粒体DNA作为模板进行特异性试验,结果表明该方法仅能特异性扩增鸡源性成分,而对其它物种未见有效扩增。通过灵敏度测试,该方法检出限达0.01%。所制定的方法特异性高,灵敏度好,可以作为食品和饲料中鸡源性成分的高效检测方法。

关 键 词：双重实时荧光PCR  细胞色素B基因 鸡源性成分  内参照  检测方法  

分 类 号：TS207] S816.17[食品科学与工程类]