文献类型：期刊文章

作　　者：吴娟[1] 马辉[1] 范小勇[1,2] 曲勍[1] 罗玉萍[2] Douglas B．Lowrie[1,2]

机构地区：[1]复旦大学附属上海市公共卫生临床中心科学研究部,上海201508 [2]南昌大学生命科学与食品工程学院

出　　处：《中华预防医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金（30901276,31170876）;国家“十二五”重大传染病专项（2012ZX10003-006,2012ZX10003-007）：上海市青年科技启明星计划（09QA1405200）衷心感谢上海交通大学第六人民医院郭盛博士对本实验数据统计分析的指导与帮助

年　　份：2012

卷　　号：46

期　　号：1

起止页码：58-63

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨以内含子A增强外源抗原在真核细胞中的表达效率及其对DNA疫苗在小鼠中免疫原性的影响。方法以分枝杆菌热休克蛋白65（Hsp65）为模式抗原，将其分别克隆入含有内含子A和不含内含子A的真核表达载体pCMV4．0和pVAX1，将表达Hsp65的不同重组质粒瞬时转染人胚肾上皮细胞系293T并免疫接种BALB／c小鼠，应用ELISA分析其所诱导产生的抗原特异性抗体水平及亚类，并以酶联免疫斑点试验（ELISPOT）和胞内细胞因子染色技术（ICS）分析其诱导产生的细胞免疫应答反应。结果含有内含子A的重组表达质粒pCMV4．0hsp65较之不含内含子A的pVAX1hsp65在293T细胞中的抗原表达量更高，免疫小鼠6周后诱导产生的抗-Hsp65特异性总IgG抗体水平（3．76±0．23对3．15±0．22，P〈0．01）和IgG2a／IgG1比值（4．08±0．04对2．234-0．12，P〈0．01）也更高，差异有统计学意义；分泌γ-干扰素（IFN-γ）的CD4^＋T淋巴细胞频率[（2．0±0．058）％对（1．5±0．087）％，t=4．804，P〈0．01]和CD8^＋T淋巴细胞频率[（0．6±0．058）％对（1．0±0．115）％，t=3．098，P〈0．05]增加，差异有统计学意义，提示其诱导产生了增强的Thl型免疫应答。结论内含子A可增强分枝杆菌Hsp65在真核细胞中的表达效率并可提高DNA疫苗在小鼠中的免疫原性。

关 键 词：内含子 疫苗 DNA  免疫 热休克蛋白质类

分 类 号：R392]