文献类型：期刊文章

作　　者：李宝珠[1,2] 陈心[1,2] 朱晓鹏[1,2] 胡远艳[1,2] 于海鹏[1,2] 邴晖[1,2] 长孙东亭[1,2] 罗素兰[1,2]

机构地区：[1]海南大学热带生物资源教育部重点实验室 [2]海南大学海口市海洋药物重点实验室,海南海口570228

出　　处：《药物生物技术》

基　　金：重大新药创制国家科技重大专项课题(2009ZX09103-644);国家自然科学基金(30860368)

年　　份：2011

卷　　号：18

期　　号：6

起止页码：471-474

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：建立以哺乳动物α3β4乙酰胆碱受体(nAChR)为分子靶标的药物筛选模型。将大鼠乙酰胆碱受体的α3与β4亚基基因分别进行体外转录,获得α3与β4亚基基因的cRNA,按1∶1的比例将适量α3与β4的cRNA混合后,显微注射到新鲜分离的非洲爪蟾卵母细胞中,在ND96溶液中、17℃下培养24 h后,通过双电极电压钳技术(TEVC)检测受体α3β4 nAChR的乙酰胆碱(Ach)门控电流。同时注入α3、β4 cRNA的非洲爪蟾卵母细胞孵育24h后,可记录到明显的Ach门控内向电流,未注射或只注射ddH2O的对照组细胞则没有任何电流产生。α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞膜上成功表达,以此为药物作用靶点,可用于大量生物毒素等物质的活性筛选实验模型。

关 键 词：α3β4乙酰胆碱受体  双电极电压钳  非洲爪蟾卵母细胞 药物筛选模型

分 类 号：Q81[生物工程类]