文献类型：期刊文章

作　　者：鲍建昌[1] 高星[1] 胡军和[1] 马晓玲[1] 王华岩[1]

机构地区：[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西省干细胞工程技术研究中心,杨凌712100

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)(No.2008AA10005);国家重点基础研究发展规划(973)(No.2009CB941002)共同资助

年　　份：2011

卷　　号：19

期　　号：6

起止页码：1019-1026

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：体外成熟的卵母细胞存在核成熟与胞质成熟不一致的情况,从而使得体外成熟的卵母细胞质量不高。本实验采用cdc2激酶抑制剂丁内酯-Ⅰ(butyrolactoneⅠ,BL-Ⅰ)抑制猪卵母细胞核体外成熟,期望解决卵母细胞体外培养过程中细胞核与细胞质发育的不同步问题。结果表明,分别用0、10、20、40和80μmol/LBL-Ⅰ处理猪卵母细胞44 h后,对卵母细胞成熟的抑制程度与BL-Ⅰ浓度的升高成正比。用20、40和80μmol/L处理时,处于生发泡(GV)期的卵母细胞分别为25%、47%和67%,与对照组(5%)相比差异极显著(P<0.01);而到达MⅡ期的卵母细胞分别为38%、9%和0,与对照组(67%)相比差异极显著(P<0.01)。将20、40和80μmol/L处理44 h后的卵母细胞,再在不含BL-Ⅰ的卵母细胞体外成熟培养液中培养44 h后,到达MⅡ期的卵母细胞为57%、41%和5%,与抑制44 h时相比均有显著差异,表明BL-Ⅰ对卵母细胞成熟的抑制作用是可逆的。20μmol/L BL-Ⅰ抑制培养20 h再正常培养24 h(20 h++24 h-处理组)后卵母细胞的成熟率显著低于对照组(正常培养44 h)(65.6%vs 70.1%,P<0.05)。对20 h++24 h-处理组成熟的卵母细胞进行孤雌激活,其卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数均好于对照组,但无显著差异;对20 h++24 h-处理组成熟的卵母细胞进行核移植(NT),获得重构胚的卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数均优于对照组,并且卵裂率有显著差异(68.9%vs 62.4%,P<0.05)。结果提示BL-I处理对猪卵母细胞的核成熟有明显抑制作用,这种抑制作用是可逆的,对猪卵母细胞孤雌胚胎发育能力和核移植胚胎的发育能力有一定的提高。

关 键 词：猪  卵母细胞 丁内酯-Ⅰ(BL-Ⅰ)  体外成熟 核移植胚胎

分 类 号：S829.2]