文献类型：期刊文章

作　　者：丁诗华[1] 杨志荣[1] 唐亚雄[1] 景仁志[1] 刘世贵[1]

机构地区：[1]四川大学生物工程研究所,成都610064

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：国家自然科学基金

年　　份：1999

卷　　号：15

期　　号：6

起止页码：968-973

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：从类产碱假单胞菌纯化出电泳纯的谷氨酸脱氢酶，用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为２９０ ｋＤ，亚基分子量为４７ ｋＤ，提示该酶为六聚体．该酶对ＮＡＤＰ（Ｈ）和底物均具有高度专一性，对谷氨酸、α－酮戊二酸及ＮＡＤＰ＋ 的Ｋｍ 值分别为：２８ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ、１．２ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ及０．０６３ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ．用Ｈｉｌｌ作图法求得酶对ＮＨ＋４ 和ＮＡＤＰＨ 的［Ｓ］０．５分别为２４ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和０．０３７ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ．最适反应温度为５０℃，催化氨化反应和脱氨反应的最适ｐＨ 分别为８．０和８．８，在热稳定性方面不及嗜热细菌的谷氨酸脱氢酶稳定．提纯的谷氨酸脱氢酶在低温（４℃）条件下，可在Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中贮存半年以上，活力无明显下降，冷冻则可导致纯酶液迅速失活．氮源对菌体谷氨酸脱氢酶水平有显著影响．

关 键 词：类产碱假单胞菌 谷氨酸脱氢酶 纯化 鉴定  酶活性

分 类 号：Q554.9]