期刊文章详细信息
重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备
Prokaryotic Expression of Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-2 and Preparation of Monoclonal Antibodies
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京100005 [2]神州细胞工程有限公司,北京100176
基 金:十一五"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX090306-004)~~
年 份:2011
卷 号:33
期 号:5
起止页码:543-548
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的利用原核表达系统(E.coli)表达纯化重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽(rhBMP-2m),并制备rh-BMP-2m的单克隆抗体。方法将工程菌株进行常规发酵,自诱导表达,裂菌离心分离包涵体,包涵体变性后经阳离子交换色谱分离纯化。纯化后的变性rhBMP-2m经稀释复性,获得具有生物学活性的rhBMP-2m。并以此作为抗原,免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体。结果获得还原SDS-PAGE下95%以上纯度的rhBMP-2m。细胞活性结果分析显示,所获得的rhBMP-2m具有较强的生物学活性。免疫小鼠最终获得两株稳定分泌抗rhBMP-2m抗体的杂交瘤细胞株。结论成功制备了具有生物学活性的rhBMP-2m及其单克隆抗体,为rhBMP-2未来的研究和制备奠定良好的基础。
关 键 词:重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽 蛋白复性 单克隆抗体
分 类 号:Q861[生物科学类]
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