文献类型：期刊文章

作　　者：李敏超[1] Juliy M. Perelman[2] Victor P. Kolosov[2] 周向东[1]

机构地区：[1]重庆医科大学附属第二医院呼吸内科,400010 [2]俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理中心

出　　处：《中华结核和呼吸杂志》

基　　金：国家自然科学基金（81070031）;国家自然科学基金中俄国际合作项目（81011120108）;中俄政府间合作项目（2009：13-01）

年　　份：2011

卷　　号：34

期　　号：10

起止页码：757-761

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨瞬时受体电位M8离子通道（TRPM8）在冷刺激诱导气道上皮细胞产生炎性因子过程中发挥的作用及相关信号转导机制。方法用冷空气（18℃）刺激人气道上皮16HBE细胞，以TRPM8通道特异性拮抗剂BCTC、TRPM8shRNA及蛋白激酶C（PKC）特异性抑制剂钙磷酸蛋白C为干预手段，将细胞分为对照组（37℃培养）、冷刺激组、冷刺激＋BCTC组、冷刺激＋转染TRPM8 shRNA组、冷刺激＋转染对照shRNA组、冷刺激＋钙磷酸蛋白C组。Western blot法检测TRPM8 shRNA转染对16HBE细胞合成TRPM8蛋白的干扰效率；钙离子成像技术测量前5组细胞内每10s间隔的相对Ca^2＋浓度动态变化；ELISA法检测各组细胞分泌的白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α蛋白含量；实时荧光定量PCR检测各组细胞中IL-6、IL．8、TNF-α mRNA表达水平。结果冷刺激组细胞内相对Ca^2＋浓度最高值为2．36±0．24，显著高于对照组的1．01±0．02（t=12．52，P〈0．01），冷刺激＋BCTC组、冷刺激＋转染TRPM8 shRNA组细胞内相对Ca^2＋浓度降为1．47±0．17和1．26±0．12，显著低于冷刺激组（t值分别为6．69、9．12，均P〈0．01）；冷刺激组的IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA和蛋白含量分别为0．66±0．16、0．77±0．15、0．73±0．09、（92±13）ng／L、（125±22）ng／L、（88±12）ng／L，较对照组[0．37±0．08、0．32±0．07、0．48±0．10、（52±8）ng／L、（50±9）ng／L、（61±8）ng/L]显著升高（t值分别为3．20、5．36、3．36、5．24、6．26、3．74，均P〈0．05），冷刺激＋BCTC组[分别为0．42±0．09、0．52±0．13、0．52±0．12、（72±8）ng／L、（92±14）ng／L、（68±11）ng／L]、冷刺激＋转染TRPM8 shRNA组[分别为0．41±0．10、0．49±0．08、0．50±0．08、（60±12）ng／L、（89±14）ng／L、（68±11）ng/L]、冷刺激＋钙磷酸蛋白C组[分别为0．40±0．07、0．44±0．09、0．47±0．08

关 键 词：瞬时受体电位通道 蛋白激酶C 白细胞介素6  白细胞介素8 肿瘤坏死因子-α  

分 类 号：R363]