文献类型：期刊文章

作　　者：刘振云[1] 沈露[1] 解凤立[2] 谭树华[1]

机构地区：[1]中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室,江苏南京210009 [2]中国药科大学药物分析教研室,江苏南京21009

出　　处：《东南大学学报（医学版）》

年　　份：2011

卷　　号：30

期　　号：5

起止页码：744-748

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:对毕赤酵母高密度表达重组抑肽酶的发酵工艺进行探讨。方法:先通过摇瓶培养方法,确定表达抑肽酶的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需的最佳配方。在此基础上,采用分批补料培养方法,对毕赤酵母pSA/GS115进行高密度发酵。紫外吸收法测定重组抑肽酶竞争性抑制胰蛋白酶对底物BAEE的水解活性。结果:BSM培养基中毕赤酵母生长必需的最佳配方为甘油40 g.L-1、氨水单次补加量0.1%、甲醇流加量1%。经过毕赤酵母高密度发酵,发酵液上清中蛋白的表达量为37.08 mg.L-1,目的蛋白活性达到4 450 BAEEU.ml-1,比摇瓶培养表达提高了8倍。结论:本发酵工艺可实现酵母工程菌的高密度表达发酵,其发酵产物具有较高的生物活性,为下一步大规模化制备抑肽酶奠定了基础。

关 键 词：毕赤酵母 高密度发酵 抑肽酶

分 类 号：TQ920.6] TQ925.9