期刊文章详细信息
多头带绦虫Tm7基因的表达及间接ELISA检测方法的建立
Prokaryotic Expression ofTm7 Gene ofTaenia multicepsand Establishment of Indirect ELISA Using the Expressed Protein
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]四川农业大学动物医学院,雅安625014 [2]四川省动物疫病预防控制中心,成都610041 [3]四川省攀枝花市农林科学研究院畜牧水产所,攀枝花617061 [4]四川省雅安市雨城区畜牧局,雅安625000
基 金:教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRTO848)
年 份:2011
卷 号:42
期 号:9
起止页码:1302-1308
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、DOAJ、IC、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:以多头带绦虫Tm7重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病早期诊断方法。本研究从羊脑多头蚴原头节提取总RNA,采用RT-PCR技术首次扩增出Tm7基因的全序列,该基因的开放阅读框为207bp,编码68个氨基酸。将此基因克隆到pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pET-32a-Tm7,经转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。以纯化后的表达蛋白作为抗原,建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白间接ELISA方法。研究结果表明,Tm7基因在大肠杆菌中成功表达,表达产物为约27ku的融合表达蛋白,该蛋白能识别羊脑多头蚴病阳性血清。建立的间接ELISA方法,检测敏感性可达93.3%,特异性达94.1%,研究结果表明Tm7重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原。
关 键 词:脑多头蚴 重组抗原 Tm7 间接ELISA
分 类 号:S852.734]
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