文献类型：期刊文章

作　　者：张晓峰[1] 刘铁连[2] 杨吉成[2] 夏蔚[1] 钟蕾[1] 孙正太[1] 王英明[1] 夏静[1]

机构地区：[1]苏州大学附属第一医院眼科,215006 [2]苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室,215006

出　　处：《中华实验眼科杂志》

基　　金：国家重点基础研究发展计划（973计划）项目（2005CB623900）、苏州大学医学发展基金项目（EE134702）.

年　　份：2011

卷　　号：29

期　　号：9

起止页码：780-785

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：背景角膜组织工程生物材料在体内应当具备透明性、一定的机械强度、生物相容性和缓慢降解的特点，丝素膜生物材料具备这些特征。目的研究采用物理交联再生丝素膜构建组织工程角膜的可行性。方法用常规培养法培养人角膜上皮细胞（CECs），将对数生长期的CECs在用家蚕丝制备的物理交联再生丝素膜上进行培养，分别于培养后24、48、72h在倒置显微镜、扫描电子显微镜下观察CECs的生长状态和形态学，并与细胞培养板培养的人CECs形态进行对照。MTT法每日检测和记录再生丝素膜培养后人CECs的增生情况，流式细胞仪检测再生丝素膜培养人CECs的细胞周期和凋亡率。将再生丝素膜4mm×3mm植入新西兰白兔右眼角膜基质层间，于术后1个月、2个月时裂隙灯下检查眼表，术后2个月摘除兔眼并制备移植眼角膜组织切片行组织病理学检查，观察再生丝素膜材料的降解情况及角膜新生血管（CNV）的生长情况。采用免疫组织化学法检测术后1个月、2个月CD34在移植眼角膜组织中的表达，并与正常眼进行对照。结果在24、48、72h3个时间点，倒置显微镜、扫描电子显微镜下见再生丝素膜培养的人CECs与细胞培养板培养法培养的人CECs形态结构无明显差别。再生丝素膜或细胞培养板培养CECs在1、2、3、4、5、6、7d各个时间点A490值比较，差异无统计学意义（F=0．641，P〉0．05）。再生丝素膜和细胞培养板培养的CECs凋亡率分别为1．8％、2．0％，细胞G2／G1期分别为1．956、1．945。再生丝素膜角膜植入后2个月时，再生丝素膜为排列整齐的胶原组织替代，角膜内新生血管和炎性细胞均少于移植后1个月。角膜免疫组织化学染色检测显示再生丝素膜植入角膜后1个月、2个月CD34表达量均明显低于Ad—VEGF165诱导的阳性对照，而与正常的角膜相比差异无统计学意义（P〉0．05）。术

关 键 词：丝素膜/物理交联再生  角膜 组织工程  生物相容性 角膜上皮细胞 角膜移植

分 类 号：R318.08[生物医学工程类]