文献类型：期刊文章

作　　者：蒙健宗[1,2] 梁莲华[3,2] 周礼芹[3,2] 罗兆飞[3,2] 王青艳[4,2]

机构地区：[1]广西大学生命科学与技术学院,广西南宁530004 [2]南宁发酵与酶工程技术研究中心,广西南宁530003 [3]南宁邦尔克生物技术有限责任公司,广西南宁530003 [4]广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西南宁530007

出　　处：《食品与发酵工业》

基　　金：广西自然科学基金重点项目(2010GXNSFD013030);南宁市科学研究与技术开发计划重大专项(200801002A,200901004A)

年　　份：2011

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：6-10

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、JST、RSC、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以热硫梭菌Clostridium thermosulfurogenes基因组为模板,PCR扩增出β-淀粉酶基因;将该基因克隆到pET-22b(+)载体上,转入大肠杆菌BL21-SI,采用NaCl形成的高渗透压诱导表达。研究了不同诱导条件对重组菌产β-淀粉酶的影响,结果以菌体密度达到OD600为0.6,诱导剂NaCl浓度为0.6 mol/L,诱导温度为35℃最佳。重组菌以LBON为培养基分批发酵时,由于营养限制,菌体密度OD600仅为4.60,β-淀粉酶活力为118U/mL。采用pH-Stat分批补料发酵时,在菌体密度仅是分批发酵的2.35倍的条件下,得到6.12倍的产酶量,酶活力达722U/mL。重组β-淀粉酶70℃水解可溶性淀粉3h的麦芽糖转化率为62.2%,高于大麦β-淀粉酶的转化率。

关 键 词：渗透压启动子  诱导  热硫梭菌  Β-淀粉酶 表达  

分 类 号：Q78]