文献类型：期刊文章

作　　者：王丁丁[1] 苏曼曼[2] 胡丽莉[1] 袁丽颖[3] 颜炜群[2]

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院,广东广州510006 [2]吉林大学药学院,吉林长春130021 [3]吉林大学附属第三幼儿园,吉林长春130021

出　　处：《现代生物医学进展》

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(81000923);吉林大学科学前沿与交叉学科创新创新项目(200903339)

年　　份：2011

卷　　号：11

期　　号：16

起止页码：3048-3051

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:研究重组人小分子抗体ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,以及ScFv-Fc的纯化方法。方法:分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生ScFv-Fc的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀结合protein A亲和层析柱,对ScFv-Fc的纯化方法进行了研究。结果:确定ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在pH5.2的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h。经过protein A亲和层析柱纯化后,ScFv-Fc纯度可达94%以上。结论:确定了ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件以及纯化方法,为重组抗体分子诊断、治疗试剂的开发以及抗体的人源化奠定了物质基础。

关 键 词：ScFv—Fc  表达  毕赤酵母 发酵优化 纯化

分 类 号：Q75] Q78