文献类型：期刊文章

作　　者：周大炜[1,2,3] 刘斌[1,2,3] 吴俊丽[1,2,3] 胡波[1] 齐源远[1]

机构地区：[1]南开大学泰达生物技术学院,天津300457 [2]天津市微生物功能基因组学重点实验室,天津300457 [3]南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室,天津300457

出　　处：《质谱学报》

基　　金：南开大学引进人才科研启动资金(No.J02006)资助

年　　份：2011

卷　　号：32

期　　号：4

起止页码：193-199

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EI、IC、JST、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：以wabD(大肠杆菌O77中O抗原基因簇内)编码的α-1,3-甘露糖转移酶、wfgD(大肠杆菌O152中O抗原基因簇内)编码的β-1,3-葡萄糖转移酶和wfeD(志贺氏菌鲍氏O14中O抗原基因簇内)编码的β-1,4-半乳糖基转移酶酶促反应产物为研究对象,尝试应用碰撞诱导解离(CID)负离子模式基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立简单、高效的糖基转移酶监测方法。该方法首先直接用质谱分析0.3μL未经色谱分离、除盐处理的反应混合物,随后应用CID串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征,实现酶活反应的快速检测。研究结果表明,CID MALDI-TOF MS平台适用于新建克隆的糖基转移酶酶活反应的监测,与现有的高通量方法相比,在速度、灵敏度、重现性、自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势。

关 键 词：脂寡糖 糖基转移酶 基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)  

分 类 号：O657.63]