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鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
Establishment of an indirect ELISA for detection of antibody against duck Tembusu virus
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫重点开放实验室,上海200241 [2]内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018
基 金:农业部动物转基因专项(2009ZX08010-022B);公益性行业(农业)专项经费资助(201003012)
年 份:2011
卷 号:33
期 号:8
起止页码:630-634
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:为建立快速检测鸭坦布苏病毒(DTV)的血清学方法,本研究利用纯化的DTV奉贤株(FX2010)作为包被抗原,建立了检测DTV血清抗体的间接ELISA方法,并且对各种检测条件进行了优化。优化后确定的抗原最适包被浓度为1.675μg/孔,抗原最佳包被条件为37℃放置2 h后,4℃下过夜,血清的最佳稀释度为1∶200,酶标抗体最适稀释度为1∶2 000。在优化条件下,阴阳性临界值判定标准为0.432。用建立的间接ELISA方法对禽流感病毒、新城疫病毒、网状内皮增生病病毒、I型鸭肝炎病毒、呼肠孤病毒、禽白血病病毒阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别为2.9%和3.9%,显示该方法具有很好的稳定性。用间接ELISA方法对140份疑似鸭坦布苏病血清样品进行检测,有108份样品呈现阳性,而琼扩试验只有32份呈阳性结果,而且用该方法检测的阳性样品包括了琼扩试验的阳性样品,证明该方法具有较高的敏感性和特异性。本研究快速检测DTV抗体间接ELISA的建立为该病的诊断和流行病学调查提供了新的方法。
关 键 词:鸭坦布苏病毒 间接ELISA 抗体
分 类 号:S852.65]
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