文献类型：期刊文章

作　　者：张成刚[1] 王风清[1] 魏东芝[1]

机构地区：[1]华东理工大学生物工程学院鲁华生物技术研究所,上海200237

出　　处：《化学与生物工程》

基　　金：中国博士后基金资助项目(20100470757)

年　　份：2011

卷　　号：28

期　　号：7

起止页码：39-43

语　　种：中文

收录情况：CAS、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：通过分析已知两种分枝杆菌的3-甾酮-Δ1-脱氢酶(kstD)碱基保守序列,设计简并引物,以甾醇降解菌株Mycobacterium neoaurumNwIB-01的DNA作模板,得到一个kstD基因片段,通过染色体走读,得到其完整的阅读框。以pUC18为异源表达载体,构建pTQ002表达质粒,在E.coliDH5α中对kstD进行了胞内活性表达,测定Mycobacteri-um neoaurumNwIB-01 kstD酶活为(0.37±0.05)U.mL-1,约为原酶活的一半,为构建高效转化生成3-酮基-1,4-二烯类固醇的基因工程菌奠定了基础。

关 键 词：3-甾酮-Δ1-脱氢酶  分枝杆菌 染色体走读  

分 类 号：Q786]