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瓜实蝇普通气味结合蛋白基因的克隆及原核表达
Cloning and prokaryotic expression of cDNA encoding general odorant binding protein from Bactrocera cucurbitae(Coquillett)
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]仲恺农业工程学院植物保护系,广州510225
基 金:国家自然科学基金项目(30971923)
年 份:2011
卷 号:30
期 号:4
起止页码:455-460
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:利用RT-PCR和RACE方法克隆获得瓜实蝇Bactrocera cucurbitae(Coquillett)普通气味结合蛋白(general odorant binding protein,GOBP)基因的cDNA全长序列,命名为BcucOBP。测序结果表明,BcucOBP开放阅读框全长447 bp,编码149个氨基酸。氨基酸序列比对及三维结构同源建模表明,此序列具有OBPs的典型特征,序列中具有6个保守的半胱氨酸和6个α螺旋区域。构建了重组表达载体pET28a(+)-BcucOBP,并转化大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE及Western blotting分析表明,在IPTG进行诱导下目标蛋白以His-标签融合蛋白的形式在宿主菌中得到稳定表达。荧光定量PCR分析表明,BcucOBPmRNA在除雌虫腹节外的各个组织中都有表达,但在触角中的表达量最高。另外,BcucOBPmRNA在昆虫前足和生殖节中具有明显的性别差异表达特征,推测其不仅具有普通气味蛋白的功能,还可能参与了信息素的运输过程,在瓜实蝇交配行为中发挥重要作用。
关 键 词:瓜实蝇 气味结合蛋白 基因克隆 组织表达特征 原核表达
分 类 号:Q966]
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