文献类型：期刊文章

作　　者：黄素文[1] 杨文潮[1] 朱海[1,2] 王建峰[1] 倪健波[1] 吕志平[1,2] 冼静雯[1,3] 刘志刚[1,3]

机构地区：[1]宁波出入境检验检疫局,宁波315012 [2]深圳出入境检验检疫局,深圳518067 [3]深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所,深圳518060

出　　处：《中国免疫学杂志》

基　　金：国家质检总局资助项目(2009IK173)

年　　份：2011

卷　　号：27

期　　号：7

起止页码：642-647

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:克隆、表达淡水小龙虾肌肉中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫活性进行鉴定。方法:根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR克隆出淡水小龙虾虾肉中过敏原tropomyosin的全长基因。将该基因与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经诱导异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化后,用Western blot检测该重组蛋白的免疫活性。结果:序列分析显示该基因包括一个编码284个氨基酸的开放阅读框,与已知虾、蟹、龙虾等的过敏原tropomyosin基因有较高同源性(>80%)。根据过敏原的命名规则,将其命名为Proc 1,并提交GenBank数据库,登录号为FJ769183。重组小龙虾tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫活性。结论:研究成功表达了具有免疫活性的淡水小龙虾原肌球蛋白,为虾过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。

关 键 词：淡水小龙虾 过敏原  原肌球蛋白 免疫活性

分 类 号：R392.11]