文献类型：期刊文章

作　　者：张程[1] 焦肖霞[1] 成永强[1] 李正平[1]

机构地区：[1]河北大学化学与环境科学学院,药物化学与分子诊断省部共建教育部重点实验室,保定071002

出　　处：《分析化学》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.20875021);河北省自然科学基金项目(Nos.B2009001525,B2009000170)资助

年　　份：2011

卷　　号：39

期　　号：7

起止页码：1083-1087

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EI、IC、JST、RCCSE、RSC、SCI(收录号：WOS:000293762100023)、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000293762100023)、SCIE、SCOPUS、UPD、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：结合简便、高效的支化滚环扩增反应与光散射技术,建立了一种均相、无标记检测单核苷酸多态性的方法。通过设计与突变型DNA完全匹配的锁式探针,突变型DNA可作为模板,使锁式探针在连接酶作用下于45℃连接成环,由Phi29 DNA聚合酶在33℃引发支化滚环扩增反应,生成大量的长链DNA产物。反应产物在0.2 mol/L HClO4介质中变性、聚集,产生强烈的光散射信号。野生型DNA与锁式探针的3%末端有一个碱基错配,不能使锁式探针连接成环和引发支化滚环扩增,仅产生很弱的光散射信号。依据二者产生的光散射信号差异,可特异性区分单碱基差别。方法灵敏度高、成本低,可准确测定1 pmol/L突变型DNA和定量检测基因突变频率。所有的成环反应、支化滚环扩增反应及光散射测定可逐步完成,无需分离、洗涤步骤,操作方便、减小了污染的风险。

关 键 词：单核苷酸多态性 光散射 支化滚环扩增  

分 类 号：Q524]